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文章來源:霍爾德電子 發布時(shi)間:2023-01-04 13:25:24 瀏覽次(ci)(ci)數:1008次(ci)(ci)
葉綠素a本身對環境沒有危害,但它是估算浮游植物生物量的重要指標,可以通過測定水中浮游植物葉綠素a的含量,掌握水體的初級生產力情況和富營養化水平,在環境監測中,葉綠素a含量(liang)是評價水體富(fu)營養化(hua)的指標之一。
中國環境科學研究院李(li)子成在《中國湖庫營養現狀調查分析(xi)》中對(dui)湖泊、水庫的營養狀態進行(xing)了分級:

比較國(guo)內外標準中葉綠素(su)a測定(ding)的關鍵(jian)步驟在(zai)于:提取試劑、濾膜(mo)類(lei)型、樣品保存方法、是(shi)否研磨機研磨后(hou)是(shi)否需要浸泡、計算方法。
1.提取試劑
除熱乙醇法,國內外標準方法均采用90%丙酮作為提取試劑。EPA446.0指出,90%丙酮溶液可以有效提取大部分藻類細胞中的葉綠素a,而且不產生其他衍生物。丙酮是國際上較為公認的提取葉綠素的試劑
2.濾膜
除《水和廢水檢測分析方法(第四版)》采用乙酸纖維濾膜外,均采用玻璃纖維濾膜。
3.樣品保存方法
樣品的保存條件各種方法略有不同,但水樣采集后均保證4℃冷藏保存,樣品濾膜可冷凍保存。而且葉綠素a測定樣品濾膜冷凍后再研磨,可提高提取效率。暨南大學水生生物研究所的林少君在《浮游植物中葉綠素a提取方法的比較與改進》的研究結果。如采樣后不立刻測定,-18℃下冰凍,再于室溫條件下融解,利用細胞內冰粒的形成和細胞液濃度的增高引起溶漲,使胞壁結構破碎引起葉綠素溶出。
4.是否研磨及研磨后是否需要浸泡
雖然研磨的方法較為費力,但是該方法操作簡單,儀器設備要求低,常溫操作不會對葉綠素a造成破壞,細胞破碎完全,對葉綠素的提取速度快,效率高,并在環境監測系統廣泛應用,考慮到方法的經典性和數據的可沿用性,新的技術線路中關于對葉綠素a的提取步驟沿用《水和廢水監測分析方法(第四版)》中的研磨方法,研磨提取葉綠素a,主要通過機械作用破壞藻類的細胞壁和葉綠體使葉綠素a溶解于丙酮,并在此基礎上進行改進。
5.計算公式及波長
關于計算方法,主要有三色法和單色法,三色法主要考慮了葉綠素b和葉綠素c對測定的干擾,測定的是表觀葉綠素a的含量(包括葉綠素a與脫鎂葉綠素a之和),單色法考慮脫鎂葉綠素a的干擾。從方法的簡便性來說,三色法操作簡單,產生誤差幾率小,耗時比單色法短;目前《水和廢水監測分析方法(第四版)》中測定葉綠素a的方法在地表水環境監測中應用最為廣泛,該方法采用丙酮研磨提取葉綠素a,用三色法計算葉綠素a的濃度。

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