葉綠素a是估算浮游植物生物量的重要指標，可以通過測定水中浮游植物葉綠素a的含量，掌握水體的初級生產力情況和富營養化水平，在環境監測中，葉綠素a含量是評價水體富營養化的指標之一。水質葉綠素a測定方法原理是將一定量樣品用濾膜過濾截留藻類，研磨破碎藻類細胞，用丙酮溶液提取葉綠素，離心分離后分別于750nm、664nm、647nm和630nm波長處測定提取液吸光度，根據公式計算水中葉綠素a的濃度。下面小編分享一下水質葉綠素a測定的具體步驟。

1.制備水樣

在過濾(lv)裝置(zhi)上裝好玻璃纖維濾(lv)膜(mo)。根(gen)據水(shui)體(ti)的營養狀態(tai)確(que)定(ding)取(qu)樣(yang)體(ti)積(ji)，具體(ti)可以參考過濾(lv)水(shui)樣(yang)體(ti)積(ji)，用(yong)量(liang)筒(tong)量(liang)取(qu)一定(ding)體(ti)積(ji)的混勻水(shui)樣(yang)，進(jin)行過濾(lv)，最(zui)后用(yong)少量(liang)蒸(zheng)餾水(shui)沖洗濾(lv)器壁。過濾(lv)時負(fu)壓不(bu)超過50kPa，在水(shui)樣(yang)剛剛完全通過濾(lv)膜(mo)時結束(shu)抽濾(lv)，用(yong)鑷子(zi)將(jiang)濾(lv)膜(mo)取(qu)出，將(jiang)有水(shui)樣(yang)的一面對折(zhe)，用(yong)濾(lv)紙吸干濾(lv)膜(mo)水(shui)分(fen)。

2.研磨

將樣品濾膜放置于(yu)研磨(mo)裝(zhuang)置中，加入3ml-4ml丙(bing)酮溶液(ye)，研磨(mo)至(zhi)糊狀。補加3ml-4ml丙(bing)酮溶液(ye)，繼續研磨(mo)，并重復1-2次，保(bao)證(zheng)充分研磨(mo)5min以(yi)上。將完(wan)全(quan)破碎后的細胞提取(qu)液(ye)轉移至(zhi)玻璃(li)刻度離心管(guan)中，用丙(bing)酮溶液(ye)沖(chong)洗(xi)研缽及研磨(mo)杵(chu)，一并轉入離心管(guan)中，定容至(zhi)10ml。

3.浸泡提取

將離心管中的研磨提取(qu)液充(chong)分振蕩混勻(yun)后，用鋁(lv)箔包好(hao)，放置于4℃避(bi)光浸(jin)泡提取(qu)2h以上(shang)，不超過(guo)24h。在浸(jin)泡過(guo)程中要顛(dian)倒搖勻(yun)2-3 次(ci)。

4.離心

將(jiang)離心管(guan)放入(ru)離心機(ji)，以(yi)相(xiang)對離心力(li)1000×g（轉(zhuan)速(su) 3000 r/min～4000 r/min）離心10min。然后用針(zhen)式濾(lv)器過(guo)濾(lv)上清液(ye)得到(dao)葉綠素(su)a的丙酮提(ti)取液(ye)（試(shi)樣）待(dai)測。

5.水樣測定

將試樣移至比色皿中，以丙酮溶液為參比溶液，于波長750nm、664nm、647nm、630nm處測量吸光度。750nm波長處的吸光度應小于0.005，否則需重新用針式濾器過濾后測定。

6.計算

最后(hou)水樣中(zhong)葉(xie)綠(lv)素a的質量(liang)濃度可以按(an)照相應(ying)公式進(jin)行計(ji)算得(de)出。

以上內容來自于《HJ 897-2017 水質 葉綠素a的測定 分光光度法》，希望(wang)對您有所幫助(zhu)。